過(guò)塘前,在冬棚標(biāo)苗塘中有少量偷死。3月10日突然降溫,12日開(kāi)始發(fā)病,發(fā)病最嚴(yán)重時(shí)在池塘邊可見(jiàn)大量趴邊的蝦,塘中有大量蝦游水,每天有大量偷死,使用各種藥物均無(wú)明顯效果。
3月19日,利洋技術(shù)員從該養(yǎng)殖池塘取樣送公司研究所進(jìn)行檢測(cè),送檢樣品蝦血細(xì)胞虹彩病毒(SHIV)呈陽(yáng)性(見(jiàn)圖2),其它病毒未檢出。進(jìn)一步對(duì)陽(yáng)性樣品測(cè)序,序列比對(duì)結(jié)果顯示其與GenBank中蝦血細(xì)胞虹彩病毒(SHIV)序列同源性為100%。
3月22日下午3點(diǎn)到該養(yǎng)殖池塘現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查,測(cè)定水溫24.2℃,水質(zhì)指標(biāo):pH值8.8、氨氮測(cè)不出、亞硝酸鹽0.05mg/L、溶解氧12.02mg/L。在池塘的四周可見(jiàn)少量趴邊的南美白對(duì)蝦,截至目前,共計(jì)損失一半(約10萬(wàn)尾)蝦。從塘邊撈起6尾趴邊蝦,外觀(guān)蝦體微微發(fā)紅,空腸空胃(見(jiàn)圖3)。分別從6尾蝦的肝胰腺接種進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng),并取鰓、肝胰腺和肌肉用95%酒精固定保存;同時(shí)從原標(biāo)苗池塘取5尾蝦樣,用95%酒精固定,帶回實(shí)驗(yàn)室做病毒檢測(cè)。
結(jié)果:6尾蝦中有2尾分離到弧菌(見(jiàn)圖4)。利用實(shí)驗(yàn)室建立的PCR方法進(jìn)行檢測(cè),采集的6尾蝦白斑綜合癥病毒(WSSV)、傳染性皮下及造血器官壞死病毒(IHHNV)、對(duì)蝦桿狀病毒(BP)、蝦肝腸胞蟲(chóng)(EHP)均呈陰性,蝦血細(xì)胞虹彩病毒(SHIV)均呈陽(yáng)性(見(jiàn)圖5)。原標(biāo)苗池塘5尾蝦樣SHIV也呈均陽(yáng)性,其它病毒呈陰性(見(jiàn)圖6)。
分析:1、2017年,中科院黃海研究所科研人員在浙江嚴(yán)重死亡的南美白對(duì)蝦上發(fā)現(xiàn)一種新病毒,相關(guān)研究報(bào)道稱(chēng)新分離的病毒屬于虹彩病毒科,但不屬于虹彩病毒科下已建立的五個(gè)屬,感染該病毒的蝦造血組織、鰓絲、肝胰腺、附肢和肌肉的血細(xì)胞中出現(xiàn)嗜堿性包涵體和核固縮現(xiàn)象,因此命名為蝦血細(xì)胞虹彩病毒(SHIV)。該病毒與2014年國(guó)家海洋局第三海洋研究所的科研人員從紅螯螯蝦中分離的紅螯螯蝦虹彩病毒(CQIV)的基因序列一致,屬于同一種病毒的不同分離株。
2、本病例,前后兩次采集的樣品,均檢測(cè)出蝦血細(xì)胞虹彩病毒(SHIV)呈陽(yáng)性,且原塘蝦和過(guò)塘之后的蝦都檢出蝦血細(xì)胞虹彩病毒(SHIV)呈陽(yáng)性。進(jìn)一步測(cè)序,比對(duì)結(jié)果正確,確定所采集的蝦樣品感染蝦血細(xì)胞虹彩病毒(SHIV)。
3、在本病例對(duì)蝦發(fā)病死亡是否由蝦血細(xì)胞虹彩病毒(SHIV)感染引起尚不能確定,但存在分塘操作和突然降溫后嚴(yán)重應(yīng)激誘發(fā)該病毒病發(fā)生的可能性。
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